红花黄色素对犬心肌缺血及血流动力学的影响

[摘要] 目的 观察红花黄色素对犬急性心肌缺血以及血流动力学的影响。 方法 采用犬冠状动脉结扎心肌缺血动物模型，注射给予红花黄色素，观察其对心肌缺血程度、心肌缺血范围及心肌缺血梗死程度的影响，对血清肌酸激酶及血清乳酸脱氢酶的影响及对血流动力学的影响。 结果 红花黄色素能减轻心肌缺血程度，降低血清肌酸激酶及乳酸脱氢酶。增加冠脉流量，增加心输出量，对心肌耗氧量无明显影响。 结论 红花黄色素对犬心肌缺血梗塞具有明显的改善作用。

[关键词] 红花黄色素；犬；心肌缺血；血流动力学；心肌耗氧量

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）24-26-03

Effect of safflor yellow on myocardial ischemia and hemodynamics in dogs

LIU Li1 WEI Yun2 BU Zhenjun3 TANG Yinghong1 YU Wangyi1 WU Aiping2 LI Yanfei2

1.Hunan University of Traditional Chinese Medicine，Changsha 410007，China；2.Hunan Institute of Pharmaceutical Industry， Changsha 410014，China；3.Hunan Jiudian Pharmaceutical Co.， LTD.， Changsha 410011， China

[Abstract] Objective To evaluate effect of safflor yellow on acute myocardial ischemia and hemodynamics in dogs. Methods The model of myocardial ischemia was induced by ligating coronary artery in dogs. Safflor yellow was administered intravenously .The effects of safflor yellow on the extent and scope of myocardial ischemia，the extent of myocardial infarction，the levels of creatine kinase and lactic acid dehydrogenase in serum and the hemodynamics were examined. Results Safflor yellow could reduce the degree of myocardial ischemia，decrease the activity of creatine kinase and lactic acid dehydrogenase in serum，and increase the coronary flow and cardiac output in dogs.Myocardial oxygen consumption in dogs had no changes. Conclusion Safflor yellow could reduces remarkably the severity of myocardial infarction and improved hemodynamics in dogs.

[Key words] Safflor yellow；Dog；Myocardial ischemia；Hemodynamics；Myocardial oxygen consumption

红花黄色素（safflor yellow，SY）是中药红花的主要有效成分，存在于红花的水溶性提取部位，由多种具有较强药理活性的生物碱组成，文献[1-3]报道红花黄色素能扩张血管、改善心肌供血、抑制血小板聚集、抑制血栓形成、抗氧化等多种药理作用。具有活血通经、散瘀止痛之功效，主治冠心病、心绞痛，用于心血瘀阻所致的胸部刺痛，绞痛，胸闷，心悸不宁等。本实验研究了红花黄色素对心肌缺血模型的保护作用，旨在为临床应用提供药理学基础，结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 药品及试剂

红花黄色素，由湖南九典制药有限公司提供，批号：090424，含量85%。复方丹参注射液，上海中西药业股份有限公司提供，批号：090335。乳酸脱氢酶试剂盒，批号：090403，肌酸激酶试剂盒，批号：000501，均由北京中生生物工程技术公司生产。

1.2 动物

健康杂种犬，体重10～12kg，雌、雄兼用。长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，合格证编号：SCXK（湘）2006-0001。

1.3 仪器

RM-6200型多导生理记录仪，MFV-3200型电磁流量计，日本光电公司产。DH-140型动物人工呼吸机，浙江医科大学医学仪器试验厂生产。

1.4 试验方法

1.4.1 红花黄色素对冠状动脉结扎犬急性心肌缺血模型的治疗作用[4-6] 健康杂种犬，体重10～12kg，随机分为5组，每组动物6只。（1） 对照组（NS）；（2）～（4）红花黄色素低、中、高剂量组（10，20，40mg/kg）；（5）复方丹参注射液组（1mL/kg），静注3%戊巴比妥钠（30mg/kg）麻醉，固定于手术台上，颈部正中切开皮肤行气管插管，接人工呼吸机，并于左侧4、5肋间开胸，暴露心脏，分离左冠状动脉，在其前降支中、下1/3处穿双线结扎，在心肌缺血区域表面缝自制十二点电极，测心外膜电图。冠状动脉结扎15min后，股静脉注射给药。经RM-6200型多导生理记录仪观察记录药前及药后不同时间心外膜电图，用LLS-2型生理信号自动检测分析系统对上述信号进行采样记录和分析，计算结扎前后ST段抬高的总和（△∑-ST）表示心肌缺血程度，计算ST段升高等于或大于2mV电极数（NST）表示心肌缺血范围。药后3h处死动物，取左心室及缺血区心肌称重，计算梗死百分比。各组动物于冠状动脉结扎后3h右心室取血，离心取血清测定乳酸脱氢酶和肌酸激酶。

1.4.2 红花黄色素对麻醉犬血流动力学的影响[4-6] 健康杂种犬，体重10～12kg，实验分组及给药方法同上。用3%戊巴比妥钠（30mg/kg）后肢静脉注射麻醉，固定于手术台。颈部正中切开皮肤行气管插管，接人工呼吸机，并于左侧胸壁4、5肋间开胸，剪开并固定心包，暴露心脏，分离主动脉根部，套入电磁流量计探头（14mm）测量心输出量（CO），分离左冠状动脉左旋支起始部，套入直径为2mm的电磁流量计探头测量冠脉流量（CAF），左心室插管经压力换能器接多导生理记录仪测取左心室内压（LVP）、左心室舒张末压（LVEDP）、左心室内压最大变化速率（+dp/dtmax、-dp/dtmax）计算左心室作功。分离股动脉，插入充满肝素生理盐水的动脉插管，经压力换能器测定动脉血压（SBP、MAP和DBP）。上述信号经RM-6200多导生理记录仪放大后，经A/D卡输入计算机，用LLS-2型生理信号自动检测分析系统检测血流动力学各参数，左心室作功和心肌张力时间指数作为心肌耗氧指标。手术完毕后，待动物各项指标稳定后测定药前值，股静脉给予不同剂量药物，给药容积为1mL/kg。记录给药后不同时间各项指标。

1.5 统计学处理[7]

应用SPSS15.0统计软件进行统计分析，计量资料用（）的形式表示，采用t检验统计学方法判断其显著性。

2 结果

2.1 对犬急性心肌缺血模型的治疗作用

动物冠脉结扎后，ST段明显升高，给予红花黄色素后，对ST段的升高有不同程度的抑制作用。对心肌缺血程度及心肌缺血范围（NST）有不同程度的抑制作用。对心肌梗死范围有不同程度的抑制作用。各剂量组动物冠状动脉结扎后，血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶含量明显升高，给予红花黄色素后，肌酸激酶及乳酸脱氢酶不同程度的降低。结果见表1～3。

表1 红花黄色素对犬心肌缺血程度及范围的影响（）

组别剂量心肌缺血程度（mV）心肌缺血范围

结扎前ST药后△∑-STNST

NS-41.25±1.16 89.88±26.64 9.67±1.63

复方丹参注射液（mL/kg）137.64±4.16 54.79±4.12** 9.00±0.63

红花黄色素

（mg/kg）1037.62±5.1365.87±4.9210.00±1.41

2036.78±8.79 52.83±8.42** 8.17±1.17

4042.79±3.84 34.87±14.31** 7.00±2.28*

注：n=6，*P<0.05，**P<0.01 vs NS

表2 红花黄色素对犬心肌梗死范围的影响（）

组别剂量心肌梗死范围（%）

梗死区/全心梗死区/左心室

NS-15.10±1.3820.06±2.02

复方丹参注射液（mL/kg）1 13.14±1.28* 17.51±1.68*

红花黄色素

（mg/kg）1013.06±1.83 17.18±2.23*

20 12.54±1.91* 16.74±2.35*

40 11.06±2.63** 14.63±3.38**

注：n=6，*P<0.05，**P<0.01 vs NS

表3 红花黄色素对犬肌酸激酶及乳酸脱氢酶的影响（）

组别剂量肌酸激酶

（U/L）乳酸脱氢酶

（U/L）

NS-206.00±28.68787.67±112.58

复方丹参注射液

（mL/kg）1 161.33±18.10** 575.67±183.05*

红花黄色素

（mg/kg）10 173.67±14.88*639.33±90.08*

20 160.33±24.57* 576.00±107.17**

40 160.00±19.10** 483.33±70.59**

注：n=6，*P<0.05，**P<0.01 vs NS

2.2 对犬左心室内压、左心室舒张末压及左室内压最大变化速率的影响

NS对照组LVP +dp/dtmax无显著性变化；红花黄色素低剂量组药后LVP +dp/dtmax无明显变化，中剂量药后1min、高剂量组药后3min与药前值比较明显升高。NS对照组LVP-dp/dtmax无明显变化；红花黄色素中剂量组LVP-dp/dtmax药后1min明显升高。NS对照组药后LVEDP无明显变化；红花黄色素低、中剂量组LVDEP与药前及对照组比较均无显著性差异，高剂量组药后0.5～3min明显升高。NS对照组LVP无明显变化；红花黄色素低、中剂量组对LVP无明显影响，高剂量组药后3～5min明显升高。

2.3 对犬心输出量、冠脉流量的影响

NS对照组动物主动脉流量无显著性变化；红花黄色素低剂量组药后无明显变化，中、高剂量组药后明显增加，其中与对照组比较，中剂量药后1min、高剂量药后1min有显著性差异，与药前值比较，中剂量药后1min、高剂量药后1min，30min有显著性差异。NS对照组冠脉流量无显著性变化；红花黄色素各剂量组药后均明显升高，低剂量药后1min、中剂量药后1～20min、高剂量药后1min与对照组比较有显著性差异。结果见表4～5。

表4 红花黄色素对犬主动脉流量的影响（，L/min）

组别剂量药前药后变化率（%）

1min10min30min

NS-0.85±0.302.72±6.250.74±5.611.35±13.87

复方丹参注射液（mL/kg）11.29±0.414.64±4.830.25±6.50 1.20±12.17

红花黄色素（mg/kg）101.06±0.34 6.22±11.782.93±9.51 4.15±14.91

200.98±0.34 18.54±9.33**△△3.05±6.744.21±9.98

400.78±0.22 23.07±13.45*△△ 8.55±10.80 13.22±9.46△

注：n=6，*P<0.05，**P<0.01 vs NS；△P<0.05，△△P<0.01 vs 药前值

表5 红花黄色素对犬冠脉流量的影响（，mL/min）

组别剂量药前药后变化率（%）

1min10min30min

NS/32.51±4.10-1.25±3.130.92±1.22-0.67±1.65

复方丹参注射液（mL/kg）133.83±9.99 16.94±11.22**△△-5.48±5.70* -5.66±13.33

红花黄色素（mg/kg）1032.80±7.07 3.42±3.62*1.75±2.10 0.76±1.46

2030.91±3.38 8.09±1.73**△△ 6.47±3.18**△△ 2.37±2.55*

4032.97±5.73 14.11±3.28**△△2.05±7.95 2.17±4.18

注：n=6，*P<0.05，**P<0.01 vs NS；△P<0.05，△△P<0.01 vs 药前值

2.4 对犬左心室做功和心肌张力时间指数的影响

NS对照组左心室作功无明显变化；红花黄色素低剂量组药后左心室作功与药前及对照组比较无显著性差异，中剂量组药后1～3min、高剂量组药后0.5min与药前值比较明显增加。NS对照组TTI无明显变化；红花黄色素药后对TTI有明显的降低作用，中剂量组药后3～10min、高剂量组药后3～10min与对照组比较有显著性差异。与药前值比较，红花黄色素中、高剂量组药后0.5～10min也明显降低。

3 讨论

急性心肌梗死是指冠状动脉供血中断引起的急性心肌坏死，心肌缺血缺氧进而发生心肌变性坏死是心肌梗死的根本原因，冠状动脉供血不足及心肌对氧的需求量增加，引起心肌氧供需失衡所导致的缺血缺氧是冠心病的主要病理生理机制，心肌缺血缺氧会导致心肌细胞代谢过程紊乱，尤其是能量物质生成锐减，正常心功能难以维持，心肌收缩及舒张功能障碍，又因血流中断，有害产物难以清除，造成心肌细胞损伤。凡能通过各种机制增加心肌供血供氧或降低心肌耗氧量的药物均有利于改善缺血缺氧性心脏病。心肌氧的供需平衡与血流动力学指标密切相关，血流动力学变化在冠心病发病机制中起重要作用，减少冠状动脉供血导致冠状动脉痉挛引起心肌缺血，运动及情绪激动因血流动力学改变增加心肌耗氧量导致心肌缺血，抗心肌缺血药物通过增加冠脉血流量，减少心肌耗氧量而起到治疗作用。因此血流动力学指标是目前研究与确定心血管药物活性的判断性指标。具有抗心肌缺血治疗冠心病的药物作用主要通过增加心肌供血，降低心肌耗氧量等环节发挥作用[8-9]。

红花黄色素是我们从红花中提取的具有较强药理活性的有效部位，根据中医气血相关理论研制开发成天然的、低毒的、有效的新型制剂，在临床上用于防治缺血性心脏病已取得了较好的疗效，本实验采用结扎犬冠状动脉方法观察红花黄色素对心肌缺血梗死程度及血流动学和相关指标的影响，结果表明，红花黄色素能使冠脉结扎犬心肌缺血程度减轻，心肌缺血范围减小，能明显抑制冠脉结扎引起肌酸激酶和乳酸脱氢酶的升高。增加主动脉流量和冠脉流量，降低犬心肌张力时间指数，以及保护心肌细胞等机制发挥其抗心肌缺血作用。

[参考文献]

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[8] 范引科，李雅.益心通对实验犬心肌缺血及血流动力学的影响[J].陕西中医，2007，28（9）：1263-1265.

[9] 聂琼嵘.红花黄素的药代动力学及药理作用研究进展[J].时珍国医国药，2003，14（8）：503.

（收稿日期：2013-10-25）